El DANAGENE MICROBIOME SOIL DNA Kit ha sido diseñado para el aislamiento de ADN genómico de alto peso molecular de microorganismos como bacterias Gram positivas y Gram negativas, arqueas y hongos a partir de muestras ambientales de todo tipo de suelos.
El kit utiliza nuevas Microbial DNA Columns, Microbiome Lysis Buffer and Microbiome Precipitation Buffer diseñados específicamente para su uso con muestras ambientales que contienen un alto contenido de sustancias húmicas, incluidos diferentes tipos de suelos difíciles.
En este procedimiento, los microorganismos se lisan eficientemente mediante una combinación de calor, lisis química y mecánica mediante homogeneización basada en “beads” especializadas. Las proteínas y los inhibidores se eliminan mediante precipitación utilizando un nuevo tampón de eliminación de inhibidores y posteriormente se sedimentan mediante centrifugación junto con las “beads” y el material de muestra sin disolver. El lisado purificado se mezcla con el tampón de unión y luego se aplica a una columna de ADN microbiano. El ADN que está unido a la columna se somete a dos pasos de lavado. Después de un paso de eliminación del etanol residual, el ADN listo para usar se puede eluir con tampón de elución (Tris/HCl 5 mM, pH 8,5).
Especificaciones:
• Diseñado para una purificación rápida y sencilla del ADN microbiano de diferentes tipos de muestras de suelo.
• Método de lisis optimizado: la combinación de calor, lisis química y mecánica mediante homogeneización basada en “beads” permite el aislamiento de ADN de arqueas, hongos y bacterias Gram negativas y Gram positivas.
• Rendimiento típico: Aprox. 1-20 µg dependiendo del tipo de muestra.
• Tiempo de preparación: 35 min.
• Volumen de elución: 50-100 µl.
• Completa eliminación de contaminantes e inhibidores.
• No se utiliza fenol/cloroformo para la extracción ni tampoco precipitación con etanol.
• El ADN eluido está listo para usarse en todas las aplicaciones posteriores estándares. En la mayoría de los casos, el ADN concentrado se puede utilizar como plantilla de PCR sin dilución adicional para lograr la máxima sensibilidad.
Aplicaciones:
• Análisis del Microbioma.
• PCR y qPCR.
• Microarrays.
• Análisis de mutaciones.
